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亲和提取

目的

探讨c—fos反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞肌钙蛋白表达的影响。

方法

烧伤血清采自30%TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠:采用含1%O2的混和气体作为缺氧模型;采用基因重组技术构建c—fos反义基因重组体;由LipofectamineKit介导心肌细胞转染;于缺氧复合烧伤血清处理1,3,7h不同时相点采用Westernblot检测c—fos蛋白,肌钙蛋白-T(TnT)的表达变化。

结果

加入烧伤血清并造成缺氧的非转染心肌细胞(简称非转染组),c—fos蛋白显著表达,3h达到最高峰,与正常对

亲和提取亲和提取
照组比较,TnT表达显著下降,7h降至最低水平;转染c-fos反义基因重组体(简称转染组)后,c-fos蛋白表达显著下降,TnT表达却显著回升。

结论

缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞TnT表达较正常心肌细胞明显减少,当在缺氧复合烧伤血清处理前转染c—fos反义基因后,心肌细胞TnT表达较单纯缺氧复合烧伤处理心肌细胞显著回升,表明c—fos反义基因转染能抑制心肌细胞TnT的表达下降。

影响

亲和提取技术是一种高通量、高灵敏度、高精度的技术平台,必将获得长足发展和广泛应用.

http://www.cqvip.com/qk/90160X/200305/9523557.html

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