伊红美蓝琼脂
**伊红美蓝琼脂(Eosin Methylene Blue Agar, EMB Agar)**是一种常用于细菌培养和分离的选择性和鉴别性培养基。它主要用于区分和培养革兰氏阴性菌,尤其是大肠杆菌(Escherichia coli)等肠道细菌。该培养基通过其独特的染色反应能够帮助微生物学家鉴别不同的细菌。
1. 组成与原理
伊红美蓝琼脂的主要成分包括:
- 伊红(Eosin)和美蓝(Methylene Blue):这两种染料具有抑制革兰氏阳性细菌的作用,因此该培养基对革兰氏阴性菌有选择性。它们还能与某些细菌的代谢产物反应,产生不同的色素变化。
- 琼脂:作为固体培养基的基础物质,提供支持细菌生长的结构。
- 乳糖(Lactose):为细菌提供碳源,帮助区分是否能发酵乳糖。
2. 选择性作用
- 革兰氏阴性细菌的选择性:伊红和美蓝对革兰氏阳性细菌有抑制作用,能够有效抑制它们的生长,使得革兰氏阴性细菌能够在该培养基上生长。
- 乳糖发酵的选择性:能够发酵乳糖的细菌(如大肠杆菌)在该培养基上会产生酸,导致pH值下降,生成绿色或蓝色的颜色反应。
3. 鉴别作用
- 大肠杆菌的特征:大肠杆菌和其他乳糖发酵的革兰氏阴性细菌在伊红美蓝琼脂上通常会呈现出绿色金属光泽,这种颜色变化是由于其快速发酵乳糖产生酸性物质引起的。
- 非乳糖发酵细菌的特征:一些革兰氏阴性细菌(如沙门氏菌、志贺氏菌等)由于不能发酵乳糖,培养时不会产生颜色变化,通常形成无色或略带淡色的菌落。
4. 临床应用
- 病原菌检测:伊红美蓝琼脂广泛用于临床样本中细菌的分离与鉴定,尤其是从尿液、粪便、痰液等中分离大肠杆菌及其他肠道病原菌。
- 快速筛查:伊红美蓝琼脂可作为筛查培养基,帮助快速筛查是否存在乳糖发酵的细菌。
5. 注意事项
- 菌落颜色的影响因素:大肠杆菌的菌落通常呈现绿色金属光泽,但在不同的培养条件下,细菌的发酵能力、pH变化等因素可能会影响颜色的强度。
- 对于某些细菌的选择性有限:对于一些非乳糖发酵的细菌,伊红美蓝琼脂的选择性可能不够强,因此需要结合其他培养基或测试进行进一步确认。
6. 参考文献
(1)Holt, J. G., Krieg, N. R., & Sneath, P. H. A. (1994). Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (9th ed.). Williams & Wilkins.
(2)Buchanan, R. E., & Gibbons, N. E. (1974). Bergey’s Manual of Microbiological Methods. Williams & Wilkins.
(3)MacFaddin, J. F. (2000). Biochemical Tests for Identification of Medical Bacteria (3rd ed.). Lippincott Williams & Wilkins.
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