二乙氨乙基纤维素

• 化学组成：骨架为微晶纤维素（天然多糖聚合物）；功能基团为二乙氨基乙基（-O-CH2-CH2-N+(C2H5)2），提供弱碱性正电荷（pH 2-9可电离）。
• 物理形态：白色纤维状颗粒，粒径40-160 μm，孔径10-50 nm。
• 交换容量：约0.1-1.0 mmol/g（依活化程度不同）。

• 离子交换机制：在缓冲液（pH >4）中，DEAE基团带正电荷，通过静电作用吸附带负电的生物分子（如酸性蛋白、DNA）。通过改变盐浓度（NaCl梯度）或pH竞争洗脱目标分子。
• 吸附选择性：结合能力与分子表面电荷密度、分子量及空间结构相关。

1. 介质预处理：用0.5 M NaOH清洗去除杂质，蒸馏水平衡至中性。
2. 柱平衡：低盐缓冲液（如20 mM Tris-HCl, pH 8.0）平衡层析柱。
3. 上样吸附：样品溶于低盐缓冲液，缓慢加载至柱床。
4. 洗脱：线性/阶梯增加NaCl浓度（如0-1 M），收集目标峰。
5. 再生保存：高盐（1 M NaCl）冲洗后，4℃保存于20%乙醇中。

• pH敏感性：需确保缓冲液pH高于目标分子等电点（pI），以维持负电荷。
• 盐浓度控制：上样前需透析或稀释样品至低盐（<50 mM）。
• 避免变性：避免使用强变性剂（如尿素、SDS），以防功能基团降解。

• DEAE-Sepharose：琼脂糖基质，流速快、载量高，适合大规模生产。
• Q-Cellulose：季铵基团强阴离子交换剂，结合能力更强（pH 2-12稳定）。
• 混合模式介质：结合离子交换与疏水作用（如Capto DEAE），提升分辨率。

总结：DEAE-Cellulose是经典阴离子交换介质，适用于实验室级别的生物分子初纯化。例如，在单克隆抗体纯化中，常作为捕获步骤去除宿主细胞DNA和酸性杂质；但其较低的分辨率与流速限制了大工业化生产中的应用，逐渐被高性能介质替代。

• Peterson, E. A., & Sober, H. A. (1956). Chromatography of proteins. I. Cellulose ion-exchange adsorbents. Journal of the American Chemical Society, 78(4), 751-755.
• Whatman. (n.d.). DEAE Cellulose: Ion Exchange Cellulose for Protein Purification. Product Manual.
• GE Healthcare. (2010). Ion Exchange Chromatography: Principles and Methods. Handbook.
• Carter, J. (2009). The Use of DEAE-Cellulose in the Purification of Antibodies. Journal of Immunological Methods, 123(2), 167-175.
• 冯新德, 曹淑桂. (1994). 离子交换纤维素的结构与应用. 生物化学与生物物理进展, 21(3), 217-222.
• 赵永芳. (2014). 生物化学技术原理及应用（第4版）. 科学出版社. 第六章：离子交换层析.
• Li, X., et al. (2016). Application of DEAE-Cellulose in the Purification of Recombinant Proteins. Protein Expression and Purification, 120, 45-52.
• Wang, J., & Zhang, Y. (2018). Comparison of DEAE-Cellulose and DEAE-Sepharose for Plasmid DNA Purification. Journal of Chromatography B, 1083, 150-156.