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二乙氨乙基葡聚糖

二乙氨乙基葡聚糖(Diethylaminoethyl-dextran,简称 DEAE-dextran)是一种由葡聚糖(dextran)经化学修饰引入二乙氨基乙基(DEAE)基团形成的阳离子聚合物。其分子中的氨基在溶液中带正电,可通过静电作用与带负电的生物大分子(如DNA、蛋白质)结合,在生物医学研究中具有重要应用。以下是综合整理的核心信息:


🧪 一、化学特性与结构

  • 基本组成:葡聚糖主链(葡萄糖聚合物)连接二乙氨基乙基基团(CHX2CHX2N(CX2HX5)X2\ce{-CH2-CH2-N(C2H5)2}),形成多聚阳离子结构27

  • 物理性质:白色粉末,易溶于水,不溶于乙醇;中性溶液中稳定,强酸或高温下易水解,碱性环境中端基可被氧化7

  • 分子量范围:商品化产品分子量覆盖广,常见规格包括 4kDa、20kDa、70kDa、500kDa 等,不同分子量适用于不同场景158

  • 氮含量:2.5%~4.5%,反映DEAE基团的修饰密度1


⚙️ 二、核心作用机制

DEAE-dextran 通过 静电吸附 实现其生物功能:

  1. 与DNA结合:带正电的DEAE基团与带负电的DNA磷酸骨架结合,形成复合物,保护DNA免受核酸酶降解,并促进细胞内存作用(endocytosis)25

  2. 与细胞膜作用:阳离子聚合物与细胞膜负电荷结合,增加膜通透性,辅助外源分子进入细胞58


🔬 三、主要应用领域

1. 基因转染技术

  • 瞬时表达:常用于哺乳动物细胞的瞬时转染(如 COS、CV-1 细胞系),效率高但毒性较大,不适用于稳定转染25

  • 两种方法

    • 复合物法:DNA 与 DEAE-dextran 混合后处理细胞;

    • 预处理法:细胞先用 DEAE-dextran 处理,再暴露于 DNA28

  • 关键步骤:转染前需去除培养血清(血清带负电会干扰复合物形成)5

2. 病毒学研究

  • 增强病毒(如衣原体)吸附宿主细胞,提高感染效率。例如:在细胞培养中加入 DEAE-dextran,通过离心促进病原体进入细胞58

3. 疫苗佐剂

  • 作为免疫增强剂,通过激活抗原提呈细胞或延长抗原滞留时间,增强疫苗免疫原性58

4. 蛋白质纯化与稳定

  • 色谱介质:DEAE-交联葡聚糖凝胶(如 DEAE-Sephadex A-25)兼具 离子交换分子筛 功能,用于纯化蛋白质、多肽、核苷酸47

  • 酶稳定剂:保护酶活性,防止降解5

5. 纳米材料载体

  • 修饰纳米颗粒(如氧化铁-葡聚糖复合物),用于靶向药物递送或成像探针10


📊 四、不同分子量规格及适用场景

分子量 (kDa)典型应用场景商品示例
4~20小分子复合物转染、佐剂DEAE-dextran 201
70~150常规基因转染、病毒研究DEAE-dextran 70/1505
500~2000大分子吸附、色谱填料DEAE-dextran 5008

⚠️ 五、使用注意事项

  1. 细胞毒性

    • 高浓度或长时间暴露可导致细胞死亡,需优化浓度(通常 0.1~1 mg/mL)和处理时间(<30分钟)2

  2. 血清干扰

    • 转染前必须用无血清培养基清洗细胞58

  3. 稳定性

    • 储存于 -20°C 干燥环境,避免反复冻融17

  4. 安全风险

    • 粉末为可燃固体(储存分类代码 11),操作时需防尘1


💎 总结

DEAE-dextran 凭借其 阳离子特性生物相容性,在基因转染、疫苗开发、蛋白纯化等领域不可或缺。

  • 优选场景:需快速瞬时表达、特定细胞系(如 COS)转染或病毒吸附增强实验;

  • 局限注意:毒性限制其在敏感细胞的应用,且不适合长期稳定表达研究25
    实际应用中需根据分子量选择合适规格,并严格控制浓度与处理时间以平衡效率与毒性。

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