二乙氨乙基葡聚糖
二乙氨乙基葡聚糖(Diethylaminoethyl-dextran,简称 DEAE-dextran)是一种由葡聚糖(dextran)经化学修饰引入二乙氨基乙基(DEAE)基团形成的阳离子聚合物。其分子中的氨基在溶液中带正电,可通过静电作用与带负电的生物大分子(如DNA、蛋白质)结合,在生物医学研究中具有重要应用。以下是综合整理的核心信息:
🧪 一、化学特性与结构
基本组成:葡聚糖主链(葡萄糖聚合物)连接二乙氨基乙基基团(),形成多聚阳离子结构27。
物理性质:白色粉末,易溶于水,不溶于乙醇;中性溶液中稳定,强酸或高温下易水解,碱性环境中端基可被氧化7。
分子量范围:商品化产品分子量覆盖广,常见规格包括 4kDa、20kDa、70kDa、500kDa 等,不同分子量适用于不同场景158。
氮含量:2.5%~4.5%,反映DEAE基团的修饰密度1。
⚙️ 二、核心作用机制
DEAE-dextran 通过 静电吸附 实现其生物功能:
与DNA结合:带正电的DEAE基团与带负电的DNA磷酸骨架结合,形成复合物,保护DNA免受核酸酶降解,并促进细胞内存作用(endocytosis)25。
与细胞膜作用:阳离子聚合物与细胞膜负电荷结合,增加膜通透性,辅助外源分子进入细胞58。
🔬 三、主要应用领域
1. 基因转染技术
瞬时表达:常用于哺乳动物细胞的瞬时转染(如 COS、CV-1 细胞系),效率高但毒性较大,不适用于稳定转染25。
两种方法:
复合物法:DNA 与 DEAE-dextran 混合后处理细胞;
预处理法:细胞先用 DEAE-dextran 处理,再暴露于 DNA28。
关键步骤:转染前需去除培养血清(血清带负电会干扰复合物形成)5。
2. 病毒学研究
增强病毒(如衣原体)吸附宿主细胞,提高感染效率。例如:在细胞培养中加入 DEAE-dextran,通过离心促进病原体进入细胞58。
3. 疫苗佐剂
作为免疫增强剂,通过激活抗原提呈细胞或延长抗原滞留时间,增强疫苗免疫原性58。
4. 蛋白质纯化与稳定
色谱介质:DEAE-交联葡聚糖凝胶(如 DEAE-Sephadex A-25)兼具 离子交换 与 分子筛 功能,用于纯化蛋白质、多肽、核苷酸47。
酶稳定剂:保护酶活性,防止降解5。
5. 纳米材料载体
修饰纳米颗粒(如氧化铁-葡聚糖复合物),用于靶向药物递送或成像探针10。
📊 四、不同分子量规格及适用场景
| 分子量 (kDa) | 典型应用场景 | 商品示例 |
|---|---|---|
| 4~20 | 小分子复合物转染、佐剂 | DEAE-dextran 201 |
| 70~150 | 常规基因转染、病毒研究 | DEAE-dextran 70/1505 |
| 500~2000 | 大分子吸附、色谱填料 | DEAE-dextran 5008 |
⚠️ 五、使用注意事项
细胞毒性:
高浓度或长时间暴露可导致细胞死亡,需优化浓度(通常 0.1~1 mg/mL)和处理时间(<30分钟)2。
血清干扰:
转染前必须用无血清培养基清洗细胞58。
稳定性:
储存于 -20°C 干燥环境,避免反复冻融17。
安全风险:
粉末为可燃固体(储存分类代码 11),操作时需防尘1。
💎 总结
DEAE-dextran 凭借其 阳离子特性 和 生物相容性,在基因转染、疫苗开发、蛋白纯化等领域不可或缺。
优选场景:需快速瞬时表达、特定细胞系(如 COS)转染或病毒吸附增强实验;
局限注意:毒性限制其在敏感细胞的应用,且不适合长期稳定表达研究25。
实际应用中需根据分子量选择合适规格,并严格控制浓度与处理时间以平衡效率与毒性。
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