碱基
碱基共有5种:胞嘧啶(缩写作C)、鸟嘌呤(G)、腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T,DNA专有)和尿嘧啶(U,RNA专有)。顾名思义,5种碱基中,腺嘌呤和鸟嘌呤属于嘌呤族(缩写作R),它们具有双环结构。胞嘧啶、尿嘧啶、胸腺嘧啶属于嘧啶族(Y),它们的环系是一个六元杂环。RNA中,尿嘧啶取代了胸腺嘧啶的位置。值得注意的是,胸腺嘧啶比尿嘧啶多一个5位甲基,这个甲基增大了遗传的准确性。
碱基通过共价键与核糖或脱氧核糖的1位碳原子相连而形成的化合物叫核苷。核苷再与磷酸结合就形成核苷酸,磷酸基接在五碳糖的5位碳原子上。
腺嘌呤与胸腺嘧啶之间有两个氢键,鸟嘌呤与胞嘧啶之间有三个氢键,即A=T,G≡C。根据碱基互补配对的原则,一条链上的A一定等于互补链上的T;一条链上的G一定等于互补链上的C,反之如此。因此,可推知多条用于碱基计算的规律。
规律一:在一个双链DNA分子中,A=T、G=C。即:A+G=T+C或A+C=T+G。也就是说,嘌呤碱基总数等于嘧啶碱基总数,各占全部碱基总数的50%;规律二:在双链DNA分子中,两个互补配对的碱基之和的比值与该DNA分子中每一单链中这一比值相等。(A1+A2+T1+T2)/(G1+G2+C1+C2)=(A1+T1)/(G1+C1)=(A2+T2)/(G2+C2);规律三:DNA分子一条链中,两个不互补配对的碱基之和的比值等于另一互补链中这一比值的倒数,即DNA分子一条链中的比值等于其互补链中这一比值的倒数。(A1+G1)/(T1+C1)=(T2+C2)/(A2+G2);规律四:在双链DNA分子中,互补的两个碱基和占全部碱基的比值等于其中任何一条单链占该碱基比例的比值,且等于其转录形成的mRNA中该种比例的比值。即双链(A+T)%或(G+C)%=任意单链(A+T)%或(G+C)%=mRNA中(A+U)%或(G+C)%;规律五:不同生物的DNA分子中,其互补配对的碱基之和的比值(A+T)/(G+C)不同,代表了每种生物DNA分子的特异性。
的值互为倒数。③一条单链的A+TC+G的值,与另一条互补链的A+TC+G的值相等;④在双链DNA及其转录的RNA之间有下列关系:一条链上的(A+T)等于另一条链上的(A+T)等于RNA分子中(A+U)等于12DNA双链中的(A+T)等,学生往往记不住。再加之转录、翻译是在不同场所进行的,学生分析问题时难以把二者联系起来。以上分析说明,关于碱基互补配对规律的计算既是教的一个难点,也是学的一个难点。教学中,如果能做到:(1)把复杂抽象的生理过程用简单直观的图示表现出来;(2)把在不同场所进行的生理过程放在一起思考;(3)把记忆复杂繁琐的公式(规律)转变成观察图示找出数量关系;(4)在计算时把表示数的符号注上脚标,以免混淆,就能轻轻松松闯过这一难关。
另外,在DNA转录成RNA时,有两种方法根据碱基互补配对原则判断:1)将模板链根据原则得出一条链,再将得出的链中的T改为U(尿嘧啶)即可;2)将非模板链的T改为U即可。如:DNA:ATCGAATCG(将此为非模板链)TAGCTTAGC(将此为模板链)转录出的mRNA:AUCGAAUCG(可看出只是将非模板链的T改为U,所以模板链又叫无义链。这也是中心法则和碱基互补配对原则的体现。)
在形成稳定螺旋结构的碱基对中共有4种不同碱基。根据它们英文名称的首字母分别称之为A(ADENINE 腺嘌呤)、T(THYMINE 胸腺嘧啶)、G(GUANINE 鸟嘌呤)、C(CYTOSINE 胞嘧啶)。每种碱基分别与另一种碱基的化学性质完全互补,这样A总与T配对,G总与C配对。这四种化学"字母"沿DNA骨架排列。"字母"(碱基)的一种独特顺序就构成一个"词"(基因)。每个基因有几百甚至几万个碱基对。
形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。组成碱基对的碱基包括A、G、T、C、U。严格地说,碱基对是一对相互匹配的碱基(即A:T, G:C,A:U相互作用)被氢键连接起来。然而,它常被用来衡量DNA和RNA的长度(尽管RNA是单链)。它还与核苷酸互换使用,尽管后者是由一个五碳糖、磷酸和一个碱基组成。
科学家们早就了解到,对包含在DNA中的遗传信息进行编码的个别碱基具有高度光稳定性,当它们吸收了来自紫外光辐射的能量时,这些能量会立刻再次释放。但令人惊讶的是,科学家们发现在包含有众多碱基的DNA中,这些机制变得失效或只是部分有效。因此,科学家们推断,紫外光激发的DNA分子的失活,必定由某种完全不同的、DNA特有的机制所取代。通过以各种方法测量具有不同碱基序列的DNA分子,德国基尔大学理化研究所弗里德里希·泰姆普斯教授所领导的研究小组终于证实并阐明了该种假设。
泰姆普斯教授表示,DNA通过其复杂的双螺旋结构达成其高度的光稳定性。在单股DNA链中,碱基之间的相互作用是一个堆叠在另一个之上,而且在双螺旋中,两个互补单股的碱基对之间的氢键发挥了关键作用。通过观察到的不同交互作用,DNA在某种程度上自己达成了“太阳防护”。
论文作者尼娜·施瓦尔博在合成DNA分子中的过程中研究了各种不同的碱基组合。利用飞秒脉冲激光光谱学,她测量了每种组合所释放出来的特征能量。她发现,对某些碱基组合而言,这些荧光发射的“寿命”只有约100飞秒,但对其他组合而言,时间可长达数千倍。
对于该研究结果,尼娜评论道:“我们研究了光物理特性,发现不同的碱基组合具有广泛的荧光发射寿命差异,这将导致开发出一种利用激光直接识别某些遗传序列的新诊断方法,而无须像现有方法那样以染料标记DNA。”
泰姆普斯解释说,在纳米电子学领域中,合成DNA已被证明能当作“纳米线”使用。基于这些分子不同的反应时间,有朝一日或许能使用激光脉冲来“开关”特定分子。在某些情况下,甚至有可能用DNA制造出通过氢键的键合来工作的晶体管。
涉及到RNA的试验,经常会要求对RNA分子进行固定化处理,这个过程通常由生物素进行标记,并辅以抗生物素蛋白作为支持物。人们使用目前的技术,可以将UMP、CMP之类的生物素化核苷酸单磷酸盐整合到RNA之中去,或者通过在转录反应中使用核苷酸单磷酸盐5'端衍生物类生物素,从而达到仅仅对RNA的5'端进行标注的目的。当然,人们也可以对纯化的RNA进行5'端或3'端的化学修饰。目前最简单的方法,就是在转录过程中对标记过程进行整合;但对于一些试验来说,对RNA进行特定位点的标记,比起对5'端进行标记或者为避免改变RNA的功能而仅仅使用单个标记物来说,似乎更为重要。
为达到上述目标,IchiroHirao及其在东京大学和RIKEN的合作伙伴对非天然碱基对进行了修饰,这些生物素化的碱基能被T7RNA聚合酶以特定位点的方式整合到RNA之中去。例如,2-氨基-6-(2-噻吩基)嘌呤(s)可以被整合到一个DNA模板之中去;接着,在一个标准化的转录反应中,已经被生物素化的2-氧-(1H)吡啶(y)在s补足位点被整合到了RNA转录过程中。这一方法很容易被一般性的试验室掌握,也可以通过引入T7RNA聚合酶的方式作为商业性的转录工具包加以应用。Hirao说:“除了那些包括像s和y或修饰性y底物这类非天然碱基的DNA模板外,这一工具包可在原始协议不加修改的情况下进行应用。”
在一篇新近出版的有关“核酸研究”的论文中,研究小组应用上述方法,在传感器上对一个反义的Raf-1RNA寡聚核苷酸适配子成功进行了生物素化和固定化的处理;这一寡聚核苷酸适配子准确地找到了它的目标靶点。
Hirao认为,这一由非天然碱基对组成的系统对于RNA技术将非常有用。如果这些非天然碱基对能和原核RNA聚合酶、真核RNA聚合酶一起发挥作用的话,这一系统的应用范围将大大扩展,甚至可以应用到体内试验。Hirao也计划将这一系统的应用扩展到复制、转录和翻译这些功能过程中。他说:“如果那些包含非天然碱基对的DNA片段能通过PCR手段进行扩增的话,这一系统作为工具进行使用的前景将更为广阔!”
卫星DNA | 遗传密码 | 核小体 |
多顺反子 | 双螺旋结构 | 半保留复制 |
2、http://www.cas.cn/html/Dir/2005/10/17/13/49/79.htm
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