永生化细胞系

1. **概述**

永生化细胞系（immortalized cell line）是指通过特定技术手段使得细胞可以在体外无限增殖的细胞。这些细胞系常用于生物医学研究，以替代初代细胞和原代细胞。永生化细胞系可来自多种来源，如人类、动物以及昆虫细胞。通过引入特定的基因或病毒，细胞的寿命可以显著延长，使其成为永生化细胞系。

2. **永生化机制**

永生化细胞系的形成通常涉及以下几种机制：

   1. **病毒感染**：某些病毒，如人乳头瘤病毒（HPV）或SV40，可以引入细胞并扰乱其正常细胞周期调控，导致永生化。

   2. **基因修饰**：通过基因工程技术引入特定基因，如人类端粒酶逆转录酶（hTERT），可以延长细胞寿命，防止细胞衰老。

   3. **细胞融合**：将正常细胞与癌细胞融合，可能产生具有永生化特性的杂交细胞系。

3. **常见永生化细胞系**

以下是一些常见的永生化细胞系及其应用：

   1. **HeLa细胞**：由海拉（Henrietta Lacks）女士的宫颈癌细胞衍生，是最早且最广泛使用的永生化细胞系，广泛用于癌症研究和药物筛选。

   2. **293T细胞**：由人胚肾细胞（HEK293）转化而来，常用于基因表达和病毒包装研究。

   3. **CHO细胞**：中国仓鼠卵巢细胞，广泛应用于生物制药，尤其是重组蛋白和抗体的生产。

4. **应用领域**

永生化细胞系在多个研究领域有广泛应用：

   1. **基础研究**：用于研究细胞生物学、分子生物学和遗传学。

   2. **药物开发**：用于高通量筛选药物，评估药物的毒性和疗效。

   3. **癌症研究**：用于研究癌症的发生机制、发展及其治疗方法。

   4. **生物制药**：用于生产疫苗、重组蛋白和单克隆抗体等生物制品。

5. **伦理和法律问题**

永生化细胞系的使用也伴随着一些伦理和法律问题。尤其是涉及到人体细胞的永生化细胞系时，必须确保获得捐赠者的知情同意，并遵循相关法律法规。此外，永生化细胞系的使用应尽可能避免引起基因污染和环境风险。

参考文献：

1. Hayflick, L. (1965). The limited in vitro lifetime of human diploid cell strains. *Experimental Cell Research*, 37(3), 614-636.

2. Graham, F. L., & van der Eb, A. J. (1973). A new technique for the assay of infectivity of human adenovirus 5 DNA. *Virology*, 52(2), 456-467.

3. Land, H., Parada, L. F., & Weinberg, R. A. (1983). Cellular oncogenes and multistep carcinogenesis. *Science*, 222(4625), 771-778.

4. Ramirez, R. D., Morales, C. P., Herbert, B. S., Rohde, J. M., Passons, C., Shay, J. W., & Wright, W. E. (2001). Putative telomere-independent mechanisms of replicative aging reflect inadequate growth conditions. *Genes & Development*, 15(3), 398-403.

5. Masters, J. R. (2002). HeLa cells 50 years on: the good, the bad and the ugly. *Nature Reviews Cancer*, 2(4), 315-319.