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吉姆萨染色

吉姆萨染色是一种Romanowsky型染色法的改良,使用由天青伊红等染料组成的复合染料。它之所以经典,是因为它能根据细胞成分的化学性质(主要是酸碱性)产生多样化的颜色反应,从而区分不同的细胞结构和成分。


核心原理

染色原理基于染料与细胞成分的酸碱结合

  1. 酸性成分(如DNA、RNA、某些胞质蛋白)带有负电荷,与染料中的碱性染料(天青/亚甲蓝) 结合,被染成紫色、蓝色或蓝紫色

  2. 碱性成分(如血红蛋白、嗜酸性颗粒)带有正电荷,与染料中的酸性染料(伊红) 结合,被染成粉红色、红色或橙红色

  3. 中性成分则呈现混合色。

这种多色性使其能提供丰富的形态学信息。


主要应用领域

1. 血液学与骨髓涂片(最经典的应用)

这是吉姆萨染色的“主场”,用于外周血涂片骨髓穿刺涂片的检查,是诊断贫血、感染、白血病等血液病的基石。

  • 红细胞:染成粉红色或橙红色。

  • 细胞核(白细胞、血小板前体):染成深紫红色。

  • 细胞质和颗粒

    • 中性粒细胞:淡粉色胞质,含淡紫色中性颗粒。

    • 嗜酸性粒细胞:亮红色/橙红色的粗大颗粒。

    • 嗜碱性粒细胞:深紫蓝色/黑色的粗大颗粒。

    • 淋巴细胞:少量天蓝色胞质。

    • 单核细胞:大量灰蓝色胞质,常有空泡。

  • 寄生虫:对疟原虫巴贝斯虫利什曼原虫等的染色效果极佳,是寄生虫病诊断的关键。

2. 细胞遗传学:染色体G显带

这是您之前问到的核型分析中的关键步骤。在此称为 “G显带”

  • 流程:染色体标本先经胰蛋白酶轻微消化,再进行吉姆萨染色。

  • 结果:染色体上出现明暗相间的条带。深带(G阳性带)为富含AT碱基对的异染色质区,浅带(G阴性带)为富含GC碱基对、基因活跃的常染色质区。

  • 意义:每条染色体都有独特的带型“指纹”,使得准确识别、配对和检测结构异常成为可能。

3. 细菌学

用于鉴别某些细菌,特别是:

  • 立克次体衣原体(在细胞内包含体)。

  • 幽门螺杆菌(在胃黏膜组织切片中)。

  • 通常与另一种染色法(如革兰氏染色)互补使用。

4. 组织病理学

在某些情况下用于特殊鉴别:

  • 突出显示肥大细胞的颗粒(染成紫红色)。

  • 识别军团菌等微生物。

  • 与H&E染色相比,能更清晰地显示某些原生动物和真菌。

5. 细胞学涂片

用于体液(如胸腹水、支气管灌洗液)的细胞学检查,有助于识别肿瘤细胞和炎性细胞。


标准染色步骤(以血涂片为例)

  1. 固定:将干燥的血涂片用无水甲醇浸泡1-5分钟,固定细胞形态。然后彻底风干。

  2. 染色:将固定后的玻片浸入新鲜配制、经过滤的吉姆萨工作液中(通常用缓冲液或去离子水按1:9或1:10稀释原液),染色15-30分钟。染色时间需根据经验优化

  3. 冲洗:用流水(最好是pH中性的缓冲液或蒸馏水)轻轻冲去浮色。

  4. 干燥:直立玻片,在空气中自然干燥。

  5. 镜检:在光学显微镜下,先用低倍镜浏览,再用油镜(100倍)观察细胞细节。


吉姆萨染色的关键特点

优点缺点
多色性:能清晰区分细胞核、胞质及各类颗粒,提供信息丰富。染色结果受多种因素影响:pH值、染色时间、染液浓度、固定方式等,需要经验控制。
成本低廉:试剂便宜,操作相对简单。一致性:不同批次、不同实验室的染色效果可能存在差异。
用途广泛:适用于血液、骨髓、染色体、寄生虫、部分细菌等多种样本。对特定目标非特异性:不如一些免疫组化或特殊染色具有特异性。
染色持久:妥善封片后,可长期保存。在组织切片中的应用有限,通常不作为首选。

与其他常见染色的对比

  • vs. 瑞氏染色:两者同属Romanowsky型染色,原理相似,常可互换。瑞氏染色更常用于快速血涂片检查,而吉姆萨染色对疟原虫等寄生虫和细胞核细节显示更佳,在细胞遗传学中是唯一选择。

  • vs. H&E染色:H&E是组织学的金标准,主要用于观察组织结构,颜色对比为“蓝核粉质”。吉姆萨是血液学和细胞学的金标准,用于观察单个血细胞形态,颜色更丰富。

  • vs. 革兰氏染色:革兰氏染色是细菌学分类的基础(分革兰阳性/阴性),吉姆萨染色用于特定的微生物鉴别。

总结

吉姆萨染色是一项基础但不可或缺的形态学技术。 它就像一位“多面手”:

  • 在血液科医生手中,是诊断血液病的“眼睛”。

  • 在遗传学家手中,是绘制染色体图谱的“画笔”。

  • 在寄生虫学家手中,是追踪病原体的“探针”。

尽管如今分子诊断技术日新月异,但吉姆萨染色因其直观、快速、经济的特点,在全球范围内(尤其是资源有限地区)的常规实验室诊断中,依然保持着核心地位。掌握吉姆萨染色的原理和判读,是每一位检验和病理工作者的基本技能。

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