血影蛋白

血影蛋白(spectrin)

又称收缩蛋白，是红细胞膜骨架的主要成份,但不是红细胞膜蛋白的成份,约占膜提取蛋白的30%。血影蛋白属红细胞的膜下蛋白，这种蛋白是一种长的、可伸缩的纤维状蛋白,长约100 nm,由两条相似的亚基∶β亚基(相对分子质量220kDa)和α亚基(相对分子质量200kDa)构成。两个亚基链呈现反向平行排列, 扭曲成麻花状，形成异二聚体, 两个异二聚体头-头连接成200nm长的四聚体。5个或6个四聚体的尾端一起连接于短的肌动蛋白纤维并通过非共价键与外带4.1蛋白结合,而带4.1 蛋白又通过非共价键与跨膜蛋白带3蛋白的细胞质面结合, 形成“连接复合物”。这些血影蛋白在整个细胞膜的细胞质面下面形成可变形的网。

目的分析887cDNA编码的蛋白质的性质及其在细胞中的定位。方法用Blastn、Blastp及TMpred分析8BTcDNA编码的蛋白质的性质。采用Northern印迹分析8B7mRNA在细胞和组织中的表达。构建重组定位表达载体，转染COS-7细胞，激光扫描共聚焦显微镜观察细胞中EGFP-887融合蛋白的表达。结果8B7cDNA编码的蛋白质长363个氨基酸，分子中有血影蛋白重复序列，它与Enaptin蛋白、Naspfin-1蛋白、Myne1蛋白及Syne-1蛋白的C末端363个氨基酸序列100％同源，是血影蛋白家族的一个新成员，故称887血影蛋白。Northern印迹分析，可见人脾脏和小肠组织有1．8kb的887mRNA表达。定位实验见COSa细胞的核膜有荧光，胞浆中也见网状的荧光。转染pEGFP-△SR887的COS-7细胞中发射荧光的部位与转染pEGFP-SB7cDNA的细胞相似。结论8B7cDNA编码的蛋白质是血影蛋白家族的一个新成员，用COS-7细胞所做的定位实验证实其定位于细胞的核膜和胞浆中的网状结构，是8B7血影蛋白C端的KASH结构域决定了其在COSa细胞中的定位