吸光度

吸光度（absorbance）源自拉丁语“absorbēre”，意为“吸收”。其定义为：光线通过溶液或物质前的入射光强度（I₀）与透射光强度（I）比值的常用对数，即 A = lg(I₀/I)。吸光度无量纲，值越大表明物质对光的吸收越强。与之相关的透射比（T）= I/I₀，故 A = -lg T。 ADFASDFAF23RQ23R

朗伯-比尔定律

吸光度遵循朗伯-比尔定律（Lambert-Beer law），表达式为 A = abc，其中 a 为吸光系数（单位：L·g⁻¹·cm⁻¹），b 为液层厚度（cm），c 为溶液浓度（g/L）。该定律成立条件包括：入射光为单色光、溶液均匀、吸光物质间无相互作用。当浓度过高或存在散射时可能偏离线性。

吸光系数

吸光系数 a 取决于物质特性和入射光波长。同一物质在固定波长下具有特征吸光系数，用于定性分析。摩尔吸光系数（ε）常用单位为 L·mol⁻¹·cm⁻¹，与 a 的关系为 ε = a × M（M 为摩尔质量）。

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单波长分光光度法

使用单一波长光源，测量样品吸光度。需用参比溶液（空白）校正溶剂和吸收池的吸收、反射及散射。 ADFASDFAF23RQ23R

双光束分光光度法

同时测量样品和参比光束，自动扣除背景干扰，提高精度。常见仪器为双光束分光光度计，使用光学性质相同、厚度相等的吸收池。 ADFASDFAF23RQ23R

多组分分析

基于吸光度的加和性：在混合体系中，总吸光度等于各组分吸光度之和。通过测量多个波长下的吸光度，解联立方程可同时测定多种组分，用于酶反应动力学或化学平衡常数测定。 ADFASDFAF23RQ23R

• 化学定量分析：绘制校准曲线（A 对 c 线性），测定未知浓度，如蛋白质定量（考马斯亮蓝法、BCA法）。
• 生化检测：核酸（DNA/RNA）纯度鉴定（A₂₆₀/A₂₈₀ 比值），酶活性测定（NADH 在 340 nm 吸光变化）。
• 制药与临床：药品含量测定，血药浓度监测，毒物筛查。
• 环境监测：水质中重金属离子或有机物浓度测定。
• 食品工业：色素含量、维生素浓度分析。
• 材料科学：薄膜透光率、半导体带隙估算。

1729年，Pierre Bouguer 首次发现光吸收与介质厚度的关系。1760年，Johann Lambert 将其数学化。1852年，August Beer 补充了吸收与浓度的关系，形成朗伯-比尔定律。20世纪30年代，商品化分光光度计出现，使吸光度测量成为常规分析手段。现代技术包括光纤光谱仪、多波长检测及微型化芯片实验室设备。 ADSFAEQWER353423413434

• 王乃兴. 分析化学（第6版）. 人民卫生出版社, 2016.
• 张华山, 王红, 赵书林. 现代分析化学. 科学出版社, 2018.
• Harris, D. C. Quantitative Chemical Analysis (9th ed.). W. H. Freeman, 2015.
• Skoog, D. A., West, D. M., Holler, F. J. Fundamentals of Analytical Chemistry (9th ed.). Brooks/Cole, 2013.