丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶

1. 超家族分类：属于真核生物蛋白激酶（ePK）超家族。根据激酶催化结构域的序列同源性和特异性调控元件，可进一步分为多个家族，如：

   • AGC家族（如PKA， PKC， PKB/Akt）： 受第二信使（cAMP， DAG， PIP3）调控。
   • CaMK家族（如CaMKII）： 受钙离子/钙调蛋白调控。
   • CMGC家族（如CDKs， MAPKs， GSK-3）： 参与细胞周期和转录调控。
   • STE家族（如MAPKKKs， MAPKKs）： MAPK级联通路成员。
   • CK1家族： 组成型活性激酶。
   • TKL家族： 与酪氨酸激酶结构类似但偏好丝/苏氨酸底物（如MLKs， RAFs）。
   • 其他（如Atypical kinases）： 具有非典型激酶结构域[2]。

2. 保守结构：

   • 催化结构域：约250-300个氨基酸，包含高度保守的N端小叶（富含β折叠）和C端小叶（富含α螺旋）， ATP结合口袋位于两叶之间的裂缝中。
   • 关键基序：如负责磷酸转移的催化环（Catalytic loop）、与ATP结合的糖环（Gly-rich loop）以及决定底物特异性的激活环（Activation loop， T-loop）。

1. 催化循环：结合ATP和底物蛋白 → 催化磷酸基团从ATP转移至底物丝/苏氨酸残基的羟基 → 释放腺苷二磷酸（ADP）和磷酸化底物。

2. 调控方式：

   • 自身磷酸化（Autophosphorylation）： 常发生在激活环上，可促进或抑制激酶活性。
   • 上游激酶磷酸化：是激活的主要方式（如MAPK级联）。
   • 第二信使结合：如cAMP、DAG、Ca²⁺/CaM等。
   • 蛋白-蛋白相互作用：与调节亚基、支架蛋白或抑制蛋白的结合。
   • 亚细胞定位：受定位信号或锚定蛋白调控，确保信号的空间特异性。

作为细胞内信号网络的中心枢纽（Central hubs）， 参与调控：

1. 信号转导通路：如MAPK/ERK通路、PI3K/AKT/mTOR通路、TGF-β/SMAD通路等，将细胞外刺激转化为细胞反应。

2. 细胞周期与分裂：细胞周期蛋白依赖性激酶（CDKs）是调控细胞周期各时相转换的关键引擎。

3. 细胞生长、代谢与存活：如AKT调控葡萄糖代谢、蛋白质合成和抑制凋亡。

4. 转录调控：磷酸化转录因子（如CREB）、共激活因子/共抑制因子及组蛋白，直接影响基因表达。

5. 细胞骨架动力学：磷酸化微管结合蛋白、肌动蛋白调节蛋白，控制细胞形态、运动和分裂。

6. 细胞凋亡与自噬：如JNK、p38促进凋亡，而mTOR抑制自噬。

丝/苏氨酸蛋白激酶的功能获得或功能丧失突变与人类疾病广泛相关，是最重要的药物靶点类别之一。

1. 癌症：

   • 癌基因：如BRAF（V600E突变）、PIK3CA（编码PI3K催化亚基）、AKT的持续激活驱动肿瘤生长。
   • 抑癌基因：如STK11（LKB1）、ATM的失活导致基因组不稳定[3]。

2. 神经退行性疾病：如GSK-3β过度活跃与阿尔茨海默病tau蛋白过度磷酸化相关；LRRK2突变与帕金森病相关。

3. 代谢性疾病：AMPK是调控能量代谢的核心激酶，其功能障碍与Ⅱ型糖尿病、肥胖相关。

4. 心血管疾病：如CaMKII过度激活与心力衰竭、心律失常相关。

5. 炎症与自身免疫病：p38 MAPK是炎症细胞因子产生的关键调节因子。

开发选择性小分子抑制剂是该领域的热点。已有多款药物成功上市：

• Vemurafenib, Dabrafenib： 靶向突变型BRAF，用于黑色素瘤。

• Palbociclib, Ribociclib： CDK4/6抑制剂，用于乳腺癌。

• Everolimus, Temsirolimus： mTOR抑制剂，用于肾癌等。

• Midostaurin： 多靶点激酶抑制剂（含PKC），用于FLT3突变AML。
  挑战在于提高选择性、克服耐药性及管理脱靶效应。

包括：激酶活性测定、磷酸化特异性抗体（Phospho-specific antibody）进行免疫印迹/免疫组化、质谱磷酸化蛋白质组学（Phosphoproteomics）、基因敲除/敲低、小分子抑制剂筛选等。