亲和分配

根据各组分的亲和能力不同而分离,常用在生物方面,如分离蛋白质,多肽等

以二氯亚砜(SOCl2)为羟基氯化试剂,聚乙二醇(PEG)为对象,对亲和配基合成中基质上羟基活化的常规方法进行了改进:通过在反应体系中引入三乙胺,使反应成为热力学上有利而大大提高了反应效率,减少了二氯亚砜的用量,并简化了工艺操作.考察了反应温度、反应时间、二氯亚砜和三乙胺加入量等因素对活化效果的影响,得到了活化程度较高的介质[1.54 mol Cl·(mol PEG)-1],并与常规二氯亚砜法和环氧氯丙烷法进行了比较.

 利用金属螯合亲和双水相分配技术对纳豆激酶的分离纯化进行了研究。考察了双水相系统、聚合物的分子量和浓度、亲和配基加入量、pH值、相比以及生物质加入量等因素对亲和分配的影响。结果表明,双聚合物系统比聚合物/无机盐系统更有利于纳豆激酶亲和分配;pH值和亲和配基加入量是影响分配的关键因素。优化的分配条件为:2.6%聚乙二醇,20.2%羟丙基淀粉,5% 亲和配基PEG-IDA-Cu(II),相比1.2,pH 8.2,发酵液加入量15%。分配系统放大到100g,仍保持一致的酶活收率(90%)和纯化因子(2.0)。设计了两次分配分离流程,纯化因子达到3.52,总收率为81%。

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