摘要: Ti质粒是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主复制的环形双链DNA分子。它控制根瘤的形成,可作为基因工程的载体。Ti是英文肿瘤诱发(tumor-inducing)的缩略式。 Ti质粒 Ti plasmid 为植物根癌土壤杆菌(Agrobactertium tumef-aciens)菌株中存在的质粒,其特定部位与植物核内DNA组合来表达信息,使植物细胞肿瘤化。即此质粒既有在细菌中表达的基因,又有在高等植物中表达的基[阅读全文:]
摘要: SD序列SD序列(Shine-Dalgarnosequence):mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。SD序列在细菌mRNA起始密码子AUG上游10个碱基左右处,有一段富含嘌呤的碱基序列,能与细菌16SrRNA3’端识别,帮助从起始AUG处开始翻译。 简介 SD序列SD序列:在细菌mRNA起始密码子AUG上游10个碱基左右处,有一段富含嘌呤的碱基序列,能与细菌16SrRNA3’端识别,帮助从起始AUG处开始翻译。在原核生物中,核糖体中与mRNA结合位点位于16SrRNA的3'端,mR[阅读全文:]
摘要: 介绍 RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。近几年来RNAi研究取得了突破性进展,被《Science》杂志评为2001年的十大科学进展之一,并名列2002年十大科学进展之首。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。 发现 1&nb[阅读全文:]
摘要: RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA) 技术是1990 年发明并发展起来的,RAPD是建立在PCR (Polymerase Chain Reaction)基础之上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。其以基因组DNA为模板, 以单个人工合成的随机多态核苷酸序列( 通常为10 个碱基对) 为引物,在热稳定的DNA 聚合酶( Taq 酶) 作用下,进行PCR 扩增。扩增产物经琼脂糖或聚丙烯酰胺电泳分离、溴化乙锭染色后,在紫外透视仪上检测多态性。[阅读全文:]
摘要: RACE的扩增原理图RACE(rapid-amplificationofcDNAends)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术,通过PCR技术实现的,无须建立cDNA文库,可以在很短的时间内获得有利用价值的信息。RACE是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段,通过往两端延伸扩增从而获得完整的3'端和5'端的方法。 主要分类 一般分5-和3-RACE两种。3-RACE较简单,首先将mRNA或总RNA用PolyT引物反转录,根据一般基因具有polyA尾巴的特点,选用特异引物(根据已[阅读全文:]
摘要: PCR简述 【1】什么是PCR PCR简单名词解释 聚合酶链式反应,其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病病的诊断或任何有DNA,RNA的地方.聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)又称[阅读全文:]
摘要: DNA连接酶连接酶旧称“合成酶”。DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4[阅读全文:]
摘要: DNA连接反应利用DNA连接酶把载体DNA和要克隆的目的DNA片段连接在一起,成为一个完整的重组分子,这就是分子克隆中常说的连接反应。当载体DNA和外源DNA末端都是由一种产生粘性末端的内切酶切割产生的话(同尾酶也可以),或者两者末端被接上一段互补的多聚体的尾巴,那么经退火后可形成新的重组分子。连接后产生的重组分子中仍然保留着外源DNA两端的限制性内切酶切点,从而使我们能方便地从重组分子再次取出所克隆的DNA段。 DNA连接介绍 DNA连接反应外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在[阅读全文:]